No,2479 : 번역]기만적인 웨스턴 블랏 검사의 국제적 기준

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번역]기만적인 웨스턴 블랏 검사의 국제적 기준

진실과“형식적(official)”HIV 감염의 구별

Brian Foley는 어떤 HIV항체 테스트도 100%완전하지 않다는걸 인정한다. 아마 그의 경고는 HIV 항체 테스트에 적용된다. 이것은 항체 테스트의 매개변수가 확인되기 전에 과학자가 HIV양성 환자의 어느 정도의 비율이 HIV 감염이 아니라는 가능성이 있다는 것을 인정해야만 하는 것을 의미한다. 여기에 두가지 의문점이 있다. 비율은 어느 정도이며 어떻게 찾을 수 있는가? 양쪽 다 매우 중요하다. 그것은 매개변수가 확인되기 전에 이 테스트를 일상적인 임상 실험에 도입하는 것이 가장 바람직하지 않기 때문이다. 양성이 HIV 감염을 의미하는지 아닌지를 의사와 환자가 가장 알고 싶어하기 때문에 우리는 잘못된 음성 결과는 무시할 것이다.

Brian Foley는 양성 결과가 HIV 감염을 반드시 의미하지 않는다는 적어도 하나의 이유를 제시한다. 즉 "환자의 약간의 항체, 또는 HIV 단백질과 결합된 항체의 수치가 올라갔다"는 것이다. 그는 Western blot bands 의 여부에 대한 설명이 "환자와 의사가 Elisa와 Wb 테스트 그리고 그 테스트를 해석하는 사람의 지식 외에 다른 데이터를 사용해야 한다“는 것을 필요로 한다는 결론에 이른다. 다음에 "환자와 의사"가 어떻게 이 작업에 스스로를 적용하는지를 설명하는 예가 제시된다. (환자는 정말로 그들 자신의 테스트를 해석하는 것에서 역
할을 하는가?)

Foley’s 해석의 요점은 "약하"거나 "강한" Wb 밴드의 수와 나타나는 시기를 포함한다. 두개의 약한 positive western blot bands는 HIV일지도, 아닐지도 모른다. 그러나 "강한 Elisa 양성 게다가 3, 4 의 강한 western blot bands는 명확히 HIV이다. 이 시스템이 권위를 가지는가 아니면 Brian이 증거를 가지고 있는가? 만일 그가 증거를 가지고 있다면 그것은 무엇인가? 그럼에도 불구하고 그는 MutiCenter AIDS Cohort Studies에서 1990까지 하나의 “강한(strong)” WB band가 HIV 감염의 증거였다는 것을 아는가? 5000명의 게이 집단에서 하나의 “강한(strong)” WB band를 지닌 멤버가“(진실로 HIV에 감염되)”인가? 우리는 또한 Brian’s 기준이 단지 positive Western blot 의 세계적인 기준의 목록에 추가할 수 있었던 또 다른 세트인 것을 주의해야만 한다.(reference 13의 차트를 참고하라)

당연히, 환자는 그들이 "공식적" 또는 "비공식적"으로 감염되었다는 것의 비밀스럽고 우스운 구별에 그다지 관심을 가지지 않는다. 그들은 단지 그들이 감염되었는지만을 알기를 원한다. 그 환자는 ＂어떤 항체의 증가된 수치 혹은 HIV 단백질과 결합된 항체＂가 HIV 항체가 아닌 운좋은 사람중 하나인가? 즉 에이즈 환자가 hypergammaglobulinaemia에 의해 묘사되는 것은 그들이 ＂어떤 항체의 증가된 수치 혹은 항체들＂을 가지고 있다는 것이다. 항체 교차 반응 때문에 아주 많은, 거의 100%의 HIV 단백질과 결합된 항체는 HIV 항체가 아니다. 2-4) 이것은 양성 테스트와 AIDS 사이의 상호 관계를 부정하지 않는다는 것에 주의하라. 그것은 완전하게 다른 문제이며 우리는 Brian이 그 구별을 안다고 믿는다. 병과 특이성이 아닌 테스트 사이의 상호 관계는 꽤 인정되고, 큰 임상적인 유용성을 가진다. 진단, 예상과 치료의 성공 또는 실패의 예측 양쪽에서. 예를 들면, 단순한 온도 측정 또는 항체 테스트와 함께 더 많이 동조되면서, 적혈구 퇴적 작용의 측정은 평가된다(ESR). 5)

언급된 것처럼, Brian’s 기준은 임의의 외견과 수많은“weak”과“strong” ELISAs와 Wb 밴드를 포함한다. 말할 것도 없이 이것은 항체 테스트 특이성의 증명이 아니다. 만일 Brian이 사과와 닮은 작은 물체를 건네받는다면 3주 후에 그에게 더 크지만 같은 것 무더기를 주는 것이 그것이 정말 사과라는 것을 증명하는가? 모든 다른 기준과 같이 Brian’s에 관한 문제는 진짜 의사(연구소 밖에서 진짜 환자와 말하는)로서 우리가 CDC과 WHO 6)을 포함한 HIV 전문가가 어떻게 그것이 "진짜" HIV 항체와 “가짜　HIV 항체”를 구별하는지를 알고 있고 싶어하는 환자 때문에 곤란을 겪을지도 모른다는 것이다. 분명히 단지 시험관 또는 길쭉한 종이 조각을 조사하는 것만으로는 이야기할 수는 없다. 우리가 거기에서 보는 것은 색의 변화이다. 반응이 일어났다는 증거가 발생한다. 이 추격을 멈추기 위해 그리고 우리가 모든 곳에서 논쟁했던 것처럼 2-3 7-13) 그 반응의 어떤 비율이 HIV이며, 또 아닌지 증명하는 유일한 방법은 그 반응의 존재 여부를 HIV의 존재 여부와 비교하는 것이다. 즉, HIV 분리의 황금 표준에 반한다. 이것은 지금까지 보고되지 않았고, 그럼에도 불구하고 항상 기본적인 요구사항으로 남아 있을 것이다.

반복적인 것의 위험을 무릅쓰고, 13) HIV 격리에서 Montagnier’s와 Gallo’s 증명 방법을 적용하려는 시도가 이루어진다면 이것이 무엇을 의미하는지 고려해볼만한 가치가 있다. HIV 분리 방법은 이것을 의미한다: 에이즈 환자로부터의 세포가 mitogens와 다른 화학 대리물질과 배양될 때, 2, 3 주 이후 그 배양은 (a) 인공 입문서-템플릿 RNA를 역으로 베껴 쓴다 (ｂ）약간의 retroviral한 분자과 유사한 약간의 입자를 포함한다.　(ｃ) 에이즈 환자의 혈청에 존재한는 항체와 반응하는 약간의 단백질을 포함한다. 이것들은 HIV 존재의 증거로 1983/84년 Science에 Montagnier와 Gallo가 제시한 자료들이다. 그러나 (a)역 전사는 모든 세포(건강하거나 건강하지 못한)의 자산이다; 14 15) 보통의, mitogenically 자극된 “non-HIV-infected” lymphocytes는 전사한다; 16 17) (b) retroviral-like한 분자는 도처에 존재한다. Gallo 자신이 1976년에 지적한 것처럼 "입자와 같은 바이러스는 형태학적으로 그리고 바이오화학적으로 typeC 바이러스와 닮았다. 그러나 사본(바이러스의 자기 복제를 말하는 것 같음)을 만드는 능력이 명백하게 없음이 자주 관찰되었다" 인간의 백혈병에서. 19) HIV와 일치하는 입자는 대다수의 보통 사람의 태반에서 발견된다. 20) HIV와 분간할 수 없는 입자가 AIDS에 걸리지 않은, 혹은 AIDS로 나타나는 면역성 결핍이 없는 환자의 커진 림프 이음매에서 자주 발견된다(90%) 21) (c) Foley박사가 상기시켰던대로 - 항체는 단지 그들의 형성을 유발하는 것 뿐만이 아니라 많은 다른 물질들과 반응한다. 22) 반응은 유일한 retrovirus의 단백질이나 항체, 혹은 어느 한 물질에만 일어나는 것이 아니다. 만일 이것이 과학적으로 유효하다면 산성 응유가 되고 있는 우유는 우유가 암소에서, 산이 레몬에서 왔다 것을 증명한다라고 주장할 수 있다. 항체들은 일부일처제가 아니기 때문에 그들의 반응은 독립적인 표준에 의해 확인되어야만 하는 것은 명확하다.

1997년에 Montagnier(HIV의 발견자)는 그의“purified virus”의 EＭ에서 retroviruses의 전형적 형태를 가진 입자를 발견할 수 없다는 것을 인정했다. 그는 또한 그 단백질을 얻기 위해서는 HIV를 정제해야 하지만 그는 HIV를 정제하지 않았다고 말했다. 그의 의견으로는 Gallo도 하지 않았다.11 13 23-25) 어느 쪽도 항체를 정제한 적이 없다. 그리고 그것은 “HIV”단백질이 지금까지 retroviral한 입자를 포함한다고 증명되지 못했던 물질로부터 나왔다는 것을 의미한다. 역의 사본(reverse transcription)이 모든 세포의 특성이며 retroviral-like 입자가 도처에 존재하기 때문에, Montagnier와 Gallo가 사용한 분리 방법을 이용해 항체 테스트의 정당성을 얻으려는 시도는 그 표준으로서 항체 테스트를 사용하는 것이 될 것이다.

Foley박사는 지금부터 ELISAs와 Western blot strips의 퍼레이드를 조사할 수 있다. 그러나 그는 어떤 특별한 항체가 색 변화를 초래하고 있는지 알 수 없을 것이다. 모든 것이　HIV 때문일 수 있고 혹은 어떤것도 HIV때문이 아닐수 있다. 테스트가 소개되고 난 후18년 도안에 적어도 위험 그룹에서는 항체 테스트의 양성이 AIDS와 관계가 있는 것은 명백하다. 그러나, 매우 분명한 것은 우리가 여전히 그 양성 테스트 결과가 retroviral한 감염 때문인지를 모른다는 것이다. 왜 과학자들이 HIV 감염에 대한 HIV 항체 테스트의 특이성을 증명할 필요를 무시했느냐는 설명할 수 없는 채로 있다. 만일 항체 테스트가 retrovirus에의 감염을 증명하지 않는다면 AIDS 연구에 소비되는 노력의 방대한 양은 완전한 잘못에 기초한다. 이것은 단지 자원의 총체의 낭비로서 보일 수 있다.

명백한 HIV WESTERN BLOT 정의하고 있는 기준의 세계적인 변화

AFR=AFRICA;1 AUS=AUSTRALIA;2 FDA=US FOOD AND DRUG ADMINISTRATION;3 RCX=US RED CROSS;3 CDC=US CENTER FOR DISEASE CONTROL;3 CON=US CONSORTIUM FOR RETROVIRUS SEROLOGY STANDARDIZATION;3 GER=GERMANY; UK=UNITED KINGDOM; FRA=FRANCE; MACS= US MULTICENTER AIDS COHORT STUDY 1983-1992. * Bands not in electrophoretic order
ＮＯＴＥ

The Association of Public Health Laboratories（공중 위생 연구소의 협회）는웨스턴 블랏 검사에서 양성 결과를 받은 환자들(즉 eg p24 and gp160 only, or gp41 and gp160 가지고있는)에게 HIV에 감염되지 않은 사람들에게도 그런 패턴이 나타나며 실제 감염 여부를 결정하기 위해서는 뒤이어 테스트가 필요하다고 말해야만 한다고 지적한다.

II. 1993년 2월 미 식품 의약국이 “HIV-1 seroindeterminate Western blot interpretations의 숫자를 줄이기 위해서 그들의 기준을 완화시켰다. 즉 HIV 양성인 개인의 숫자를증가 시키기 위해서. 5)

1. WHO. (1990). Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS). Proposed criteria for interpreting results from Western blot assays for HIV-1, HIV-2 and HTLV-I/HTLV-II. Weekly Epidemiological Record 65:281-298.

2. Healy DS, Maskill WJ, Howard TS, et al. (1992). HIV-1 Western blot: development and assessment of testing to resolve indeterminate reactivity. AIDS 6:629-633.

3. Lundberg GD. (1988). Serological Diagnosis of Human Immunodeficiency Virus Infection by Western blot Testing. Journal of the American Medical Association 260:674-679. (Data presented in this paper reveal that when the FDA criteria are used to interpret the HIV Western blot less than 50% of US AIDS patients are HIV positive whereas 10% of persons not at risk of AIDS are also positive).

4. Mylonakis E, Paliou M, Greenbough TC, Flaningan TP, Letvin NL, Rich JD. Report of a false-positive HIV test result and the potential use of additional tests in establishing HIV serostatus. Archives of Internal Medicine 2000;160:2386-8.

5. Keinman S, Busch MP, Hall L, et al. (1998). False-positive HIV-1 test results in a low -risk screening setting of voluntary blood donation. Journal of the American Medical Association 280:1080-1083.

왼쪽의 각각의 수평 밴드는 항체가 반응할 수 있는 단백질을 나타낸다. 환자로부터의 혈청은 길쭉한 조각에 추가하게 된다. 그리고 수평 밴드는 나타난다. 반응하고 있는 항체가 있었던 곳에 채색되어 있는 밴드는 나타난다. 같은 바이러스에 대해 양성 결과를 결정하는 위해 그 수와 위치는 세계 여러 지역마다 다양하다.

예를 들면 CDC 기준에 관한 뉴욕시의 양성반응인 사람이 호주 시드니에서 양성이 아닌 것과 같은 부조화를 가져온다. 또는 p41, p32, p24와 p18 밴드와 더불어 오스트레일리아의 양성은 아프리카에서는 양성이 아니다. 또는 p41과 p120 밴드와 더불어 아프리카에서의 양성은 호주(미국 또는 유럽의 부분)에서는 양성이 아니다. 이러한 혼란은 연구소의 진단 매뉴얼에서 확인된다. The Genelabs Diagnostic HIV BLOT 2.2 Western blot Assay Instruction Manual은 충고한다 특정 가이드라인은 지방의 정책에 따라 다를지도 모른다. GENELABS는 지방의 법규에 의거한 정책에 따르는 것을 추천한다. 이것의 뒤에 “다른 국제 규제”에 의한 Western blot의 양성을 정의하는 것의 7 가지 다른 기준이 계속된다. Genelabs 은 또한 추가한다. “우리는 the Genelabs Diagnostic HIV BLOT 2.2의 해석을 위한 가이드라인을 추천한다” 그리고 Western blot양성의 8번째 기준을　목록에 추가했다.(Packet Insert, 1998) 이것은 “다른 국제 규제” 또는 “지역 정책”을 의미한다. 그리고 가정되었던 병원균은 retroviral한 감염을 증명한다라는 말을 듣는 항체 반응성의 패턴을 결정하지 않는다. 제조업자 Bio-Rad는 Western blot을 사용하고 있는 각각의 연구소가 테스트의 밴드 해석의 스스로의 기준을 개발해야만 한다고 알린다. 혹은, 밴드 해석은 임상의에게 달려 있을지도 모른다"(Bio-Rad 연구소 매뉴얼 1993).

출처
http://bmj.com/cgi/eletters/326/7387/495#33450